動(dòng)物組織石蠟包埋和切片實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

簡(jiǎn)要描述：石蠟包埋能夠保護(hù)樣本、固定組織結(jié)構(gòu)、促進(jìn)切片和染色等

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組織石蠟包埋和切片：

1、切取組織，浸泡在4％用pH7.4 BS配成的甲醛固定劑中，室溫24小時(shí)。

附：4％甲醛固定劑（5ml）：4.5ml 1×PBS(pH7.4)+0.5ml甲醛

2、倒掉甲醛固定劑，加pH7.4 BS,每隔8小時(shí)更換一次，4℃保存，換液共3天。

3、打開烘箱，調(diào)溫至62℃，融石蠟。

4、酒精梯度脫水（30％、50％、70％、80％、90％、95%、100％×2），隔30分鐘更換一次。

5、50％酒精＋50％二甲苯30分鐘（過渡步驟）。

6、100％二甲苯，時(shí)刻觀察組織塊至透明。

7、放入烘箱中已經(jīng)預(yù)融的50％石蠟＋50％二甲苯中，30分鐘。

8、100％石蠟兩遍，每次2小時(shí)。(若石蠟浸潤(rùn)不夠，仍有二甲苯，則包埋后的石蠟塊較脆，易分層、斷裂。)

9、100％石蠟紙盒內(nèi)凝固（先用蠟打底，再放入組織塊，澆上蠟包埋，放入4℃冰箱或水中冷凝，標(biāo)明組織塊放入方向），4℃存放備用。

10、修塊。

11、融化石蠟?zāi)ㄓ趬K底，貼在木塊上，壓實(shí)。

12、切片（5－10μm）,將切片平展于平板上，光面朝上。

13、將光面朝下，將石蠟薄切片放于水面上（水溫40℃），使其伸展。（時(shí)間勿太長(zhǎng)）。

14、將石蠟薄片貼在預(yù)先處理好的玻片上。

15、40℃烘烤過夜。

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