骨髓間充質(zhì)干細胞原代培養(yǎng)實驗

簡要描述：骨髓間充質(zhì)干細胞原代培養(yǎng)實驗是伊萊博生物的基礎(chǔ)服務(wù)項目之一，由專業(yè)的實驗人員操作完成。

更新時間：2023-10-30
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大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞是干細胞研究的主要種子細胞之一。它能夠成骨、成脂和成軟分化,并具有很強的增殖能力。研究中使用的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的來源主要是購買商品化細胞系或者從大鼠股骨和脛骨中提取。
目前,提取大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的主要方法是全骨髓貼壁法。該方法主要利用骨髓間充質(zhì)干細胞易貼壁的特性將其與其他血細胞分離開來。主要步驟是將大鼠股骨和脛骨骨髓抽吸出來,然后使用注射器和含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基吹打骨髓組織形成單細胞懸液,再用200目濾網(wǎng)過濾掉剩余組織塊, 1200rpm離心5分鐘,棄上清,使用5ml含有10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基重懸細胞沉淀,后將單細胞懸液放入無菌培養(yǎng)瓶中培養(yǎng), 48小時后換液。該訪法步驟繁瑣,過濾步驟和離心步驟增加了污染的幾率和細胞的損耗量。離心后大量紅細胞和干細胞混雜在一起,影響了干細胞的貼壁，導(dǎo)致原代細胞中干細胞比例較低,培養(yǎng)基營養(yǎng)損耗。

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